بررسی بیان ژن RORA در بیماران مبتلا به مولتیپل اسکلروزیس MS)) در مقایسه با گروه شاهد در جمعیت ایرانی

نوع مقاله: مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 گروه زیست شناسی، واحد دامغان، دانشگاه آزاد اسلامی، دامغان، ایران

2 گروه ژنتیک پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران

چکیده

بیماری مولتیپل اسکلروزیس MS)) یکی از مهم­ترین بیماری­های خودایمن است که سیستم اعصاب مرکزی را هدف قرار می­دهد. این بیماری به عنوان دومین عامل ناتوانی حرکتی در دنیا شناخته شده و گسترش روزافزونی داشته است. گرچه علل اصلی بروز بیماری ام اس همچنان ناشناخته است اما احتمال می­رود سلول­های CD4(+) T اختصاصی میلین، نقش مرکزی را در آغاز و هماهنگی التهاب CNS ایفا می­کنند. طبق این نظریه، سلول­هایCD4(+) T  فعال شده در پریفرال به CNS نفوذ کرده در آنجا با القا ترشح سیتوکین­ها و کموکین­ها باعث آغاز آبشار التهابی می­شوند. سلول­های Th17 که یک رده از سلول­های CD4(+) T  به تازگی شناسایی شده­اند در بروز مالتیپل اسکلروزیس نقش عمده­ای را ایفا می­کند. با توجه به نقش ژن  RORΑدر مسیرهای تکاملی سلول­های Th17 و همچنین انواع گیرنده­های ROR به عنوان اهداف درمانی ام اس، بررسی این ژن در بیماران می­تواند در تشخیص و یافتن علل مولکولی بیماری کمک کند. 30 نفر بیمار مبتلا به مالتیپل اسکلروزیس و 30 نفر فرد سالم که از نظر سن و جنس همسان­سازی شدند، انتخاب گردیدند. بعد از پر کردن پرسشنامه از افراد خون­گیری انجام شد و Total RNA استخراج و سپس cDNA سنتز شد. با روش TaqMan Real-Time PCR بیان ژن  RORAمورد بررسی قرار گرفت. داده­های بدست آمده بوسیله نرم­افزارهای Linreg و REST 2009 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. نتایج نشان داد بیان ژن RORA در افراد مبتلا به ام­اس در مقایسه با افراد نرمال کاهش معنی­داری نشان نمی­دهد (197/0p= ). همچنین مقایسه بیان این ژن در دو جنس زن و مرد هم کاهش معنی­داری نشان نداد (142/0p=، 156/0p=). نتایج بیانگر عدم تفاوت معنی دار بیان ژن RORA در بیماران MS نسبت به افراد سالم و کنترل می­باشد. می­توان چنین نتیجه­گیری کرد که سطح بیان ژن RORA تاثیر مهمی در این بیماری نداشته باشد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Investigation of RORA Gene Expression in Iranian Multiple Sclerosis (MS) Patients

نویسندگان [English]

  • Sakineh Nayeri 1
  • Arezoo Sayad 2
  • Vida Hojati 1
  • Mohammad Taheri 2
1 Department of Biology, Damghan Branch, Islamic Azad University, Damghan, Iran
2 Department of Medical Genetics, Shahid Beheshti University, Tehran, Iran
چکیده [English]

Multiple sclerosis (MS) is one of the most important autoimmune diseases targeting central nervous system (OMIM: 126200). It is known to be the second factor of movement disability in the world which is increasing in recent years. It is essential to perform fundamental and functional studies on its prevention and treatment. Although the major causes of MS incidence are still unclear, CD4 (+) myelin-specific T cells play central role in generation and inflammation balance. Accordingly, activated CD4 (+) T cells in peripheral, penetrate into the CNS and trigger the inflammation cascade by inducing secretion of cytokine and chemokine. Among Th17 cells, one of CD4 (+) T cell lines is recently shown to be mainly involved in MS incidence. The role of RORA gene in the developmental pathways Th17 cells, and regarding evidence suggesting RORA receptors as potential treatment targets respecting inflammation disorders such as MS. Study on this gene would help us to discover the molecular causes of MS. We selected 30 individuals affected with MS and 30 healthy normal controls matched in gender and age. After filling a questionnaire, peripheral blood was obtained and total RNA was extracted by GeneAll kit. Then, cDNA was synthesized using GeneAll cDNA synthetize kit. Expression of RORA gene was investigated using TaqMan Real-Time PCR. Results were analyzed using Linreg and Rest 2009 software. Expression of RORA gene was not significantly reduced compared to controls (P=0.197). Moreover, expression of RORA gene was not significantly different between genders (P=0.142, P=0.156). There was no significant difference in RORA gene expression between cases and control group. Expression level of RORA gene may have not important effect on the disease.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Multiple Sclerosis
  • Gene expression
  • RORA
  1. Bettelli E., Carrier Y., Gao W., Korn T., Storm T.B., Oukka M., Weiner H.L., Kuchroo V.K., 2006. Reciprocal developmental pathways for the generation of pathogenic effector TH17 and regulatory T cells. Nature, 441, 235-238.
  2. Bi Y., Liu G., Yang R., 2007. Th17 cell induction and immune regulatory effects. Journal of Cellular Physiology, 211: 273-278.
  3. Chen Z., Laurence A., O'shea J.J., 2007. Signal transduction pathways and transcriptional regulation in the control of Th17 differentiation.  Seminars in Immunology, 2007: 400-408.
  4. Chen Z., O’shea J.J., 2008. Th17 cells: a new fate for differentiating helper T cells. Immunologic research, 41: 87-102.
  5. Dzhagalov I., Giguere V., He Y.W., 2004. Lymphocyte development and function in the absence of retinoic acid-related orphan receptor α. The Journal of Immunology, 173: 2952-2959.
  6. Haerian B.S., Shaari H.M., Tan H.J., Fong C.Y., Wong S.W., Ong L.C., Raymond A.A., Tan C.T., Mohamed Z., 2015. RORA gene rs12912233 and rs880626 polymorphisms and their interaction with SCN1A rs3812718 in the risk of epilepsy: A case–control study in Malaysia. Genomics, 105: 229-236.
  7. Hennings J., Uhr M., Klengel T., Weber P., Putz B., Touma C., Czamara D., Ising M., Holsboer F., Lucae S., 2015. RNA expression profiling in depressed patients suggests retinoid-related orphan receptor alpha as a biomarker for antidepressant response. Translational Psychiatry, 5: e538.
  8. Ivanov I.I., Mckenzie B.S., Zhou L., Tadokoro C.E., Lepelley A., Lafaille J.J., Cua D.J., Littman D.R., 2006. The orphan nuclear receptor RORγt directs the differentiation program of proinflammatory IL-17+ T helper cells. Cell, 126: 1121-1133.
  9. Jetten A.M., 2009. Retinoid-related orphan receptors (RORs): critical roles in development, immunity, circadian rhythm, and cellular metabolism. Nuclear Receptor Signaling, 7:e003.
  10.  Kano H., Takayama T., Midorikawa Y., Nagase H., 2016. Promoter hypomethylation of RAR-related orphan receptor α 1 is correlated with unfavorable clinicopathological features in patients with colorectal cancer. BioScience Trends, 10(3): 202-209.
  11.  Khaiboullina S.F., Gumerova A.R., Khafizova I.F., Martynova E.V., Lombardi V.C., Bellusci S., Rizanov A.A., 2015. CCL27: Novel Cytokine with Potential Role in Pathogenesis of Multiple Sclerosis. BioMed Research International, 2015: 1-10,
  12.  Kojetin D.J., Burris T.P., 2014. REV-ERB and ROR nuclear receptors as drug targets. Nature Reviews of Drug Discovery, 13: 197-216.
  13.  Leppkes M., Becker C., Ivanov I.I., Hirth S., Wirtz S., Neufert C., Pouly S., Murphy A.J., Valenzuela D.M., Yancopoulos G.D., 2009. RORγ-expressing Th17 cells induce murine chronic intestinal inflammation via redundant effects of IL-17A and IL-17F. Gastroenterology, 136: 257-267.
  14.  Logue M.W., Baldwin C., Guffanti G., Melista E., Wolf E.J., Reardon A.F., Uddin M., Wildman D., Galea S., Koenen K.C., 2013. A genome-wide association study of post-traumatic stress disorder identifies the retinoid-related orphan receptor alpha (RORA) gene as a significant risk locus. Molecular Psychiatry, 18: 937-942.
  15.  Rostami A., Ciric B., 2013. Role of Th17 cells in the pathogenesis of CNS inflammatory demyelination. Journal of the Neurological Sciences, 333: 76-87.
  16.  Sadeghi H., Gupta Y., Möller S., Samavedam U.K., Behnen M., Kasprick A., Bieber K., Muller S., Kalies K., De Castro Marques A., 2015. The retinoid‐related orphan receptor alpha is essential for the end‐stage effector phase of experimental epidermolysis bullosa acquisita. The Journal of Pathology, 237: 111-122
  17. Yang X.O., Pappu B.P., Nurieva R., Akimzhanov A., Kang H.S., Chung Y., Ma L., Shab B., Panopoulos A.D., Schluns K.S., 2008. T helper 17 lineage differentiation is programmed by orphan nuclear receptors RORα and RORγ. Immunity, 28: 29-39.
  18.  Yin S., 2012. Gait Analysis of Multiple Sclerosis Patients. MSc Thesis, Arizona State University.

17.               Veldhoen M., Hocking R.J., Atkins C.J., Locksley R.M., Stockinger B., 2006. TGFbeta in the context of an inflammatory cytokine milieu supports de novo differentiation of IL-17-producing T cells. Immunity, 24: 179-189.